Polimeraz Zincir Reaksiyonu (PCR) ve STD Testi

Posted on
Yazar: Virginia Floyd
Yaratılış Tarihi: 7 Ağustos 2021
Güncelleme Tarihi: 12 Mayıs Ayı 2024
Anonim
Polimeraz Zincir Reaksiyonu - PCR (Biyoloji / Biyomoleküller)
Video: Polimeraz Zincir Reaksiyonu - PCR (Biyoloji / Biyomoleküller)

İçerik

Polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) analizi bir laboratuvar tekniğidir. PCR testinin amacı, bir örnekte küçük miktarlarda DNA bulmaktır. amplifikasyon. PCR amplifikasyonu sırasında, ilgilenilen DNA, analiz ve tespit için yeterli olana kadar tekrar tekrar kopyalanır. Örneğin, PCR, bir idrar örneğinde bulunan gonore veya klamidya'ya neden olan organizmalardan küçük miktarlarda DNA'yı tanımlamak için kullanılabilir.

PCR Nasıl Çalışır?

PCR'nin ilk adımı, primerler. Bunlar, tespit etmeye çalıştığınız DNA örneğinin uçlarına uyan kısa DNA dizileridir. Belirli bir DNA parçasını bulmanın, büyütmenin ve tespit etmenin püf noktasıdır. Bu DNA parçası bir patojeni tanımlamak için kullanılabilir. Ayrıca antibiyotik direnci için genleri tespit etmek gibi şeyler yapmak için de kullanılabilir.

Primerlerinizi aldıktan sonra, PCR'deki bir sonraki adım, numuneyi çift iplikli DNA'nın iki tek ipliğe ayrılması için ısıtmaktır - buna denir. denatürasyon. Sonra astarlarörnek DNA ile birleştirilir. Bundan sonra bir DNA polimeraz primer konumunda DNA replikasyonunu başlatmak için kullanılır. Son olarak, DNA telleri bir kez daha ayırmak için ısıtılır. Bununla birlikte, tüm PCR süreci yeniden başlar.


Numunede bulunan ilgilenilen DNA segmentinin miktarı, her PCR döngüsünde üssel olarak artar. İlk döngüde, bir kopya iki olur. Sonra iki kopya dört olur, sonra sekiz olur vb. Bu üstel büyüme, söz konusu DNA'nın mevcut olup olmadığını belirlemek için genellikle sadece 20 ila 40 döngü gerektiği anlamına gelir. (DNA varsa, 20-40 döngü de analiz için yeterli örnek sağlamak için yeterlidir).

Bir polimeraz zincir reaksiyonunun tüm aşamaları - DNA'yı denatüre eder, primerleri uygular ve DNA'yı uzatır - farklı sıcaklıklarda gerçekleşir. Bu, ilk karışım bir araya getirildikten sonra, adımların şu adla bilinen bir işlemle kontrol edilebileceği anlamına gelir: ısıl döngü. Isıl döngü, sıcaklığın her adımın gerçekleşmesi için yeterince uzun süre gerekli seviyelerde tutulması anlamına gelir. Dolayısıyla, PCR, hedef DNA miktarını yükseltmenin etkili bir yoludur. Aslında, insan müdahalesine çok az ihtiyaç duyarak tek bir test tüpünde gerçekleştirilebilir.


Polimeraz zincir reaksiyonu, ilk geliştirildiği 1980'lerin başında biyolojik teknikte bir devrimi temsil ediyordu. PCR'nin yaratıcısı Kary Mullis, 1993'teki çalışmasıyla Nobel Kimya Ödülü'nü kazandı.

PCR STD Testiyle Neden Önemlidir?

Polimeraz zincir reaksiyonu ve benzeri teknikler ligaz zincir reaksiyonuSTD testi için önemi giderek artmaktadır. Bunun nedeni, bu tekniklerin numunelerdeki küçük miktarlarda viral DNA veya RNA'yı doğrudan tanımlayabilmesidir. Bir patojenin genetik kodunu belirlemek, bakteriyel kültür veya viral kültürden farklı olarak patojenin canlı olmasını gerektirmez. Ayrıca, insanların tespit edilebilir bir antikor reaksiyonu geliştirmesi için enfeksiyonun yeterince uzun bir süre önce meydana gelmesini gerektirmez (enfeksiyonların ELISA tarafından tespit edilme şekli) Bu, PCR tekniklerinin bazen hastalıkları diğer testlerden daha erken tespit edebildiği anlamına gelir. Daha da iyisi, STD'ler, numuneleri canlı tutma veya tam olarak doğru zamanda test etme konusunda endişelenmeye gerek kalmadan tespit edilebilir.


Evde En İyi STD Testleri